Магнитный набор ДНК почвы и стула

A-1 Низкая концентрация клеток или вируса в исходном образце - Увеличьте концентрацию клеток или вирусов.

A-2 Недостаточный лизис образцов - образцы не были тщательно перемешаны с лизисным буфером. Рекомендуется 1-2 раза тщательно перемешать импульсным встряхиванием. —Недостаточный лизис клеток, вызванный снижением активности протеиназы К. —Недостаточный лизис клеток или деградация белка из-за недостаточного времени проведения теплой ванны. Рекомендуется разрезать ткань на мелкие кусочки и продлить время ванны, чтобы удалить все остатки лизата.

A-3 Недостаточная адсорбция ДНК. - Не добавляли этанол или низкопроцентный этанол вместо 100% перед переносом лизата в спин-колонку.

A-4 Значение pH буфера для элюирования слишком низкое. —Установите pH в пределах 8,0-8,3.

Остаточный этанол в элюенте.

- В элюенте имеется остаточный промывочный буфер PW. Этанол можно удалить центрифугированием спин-колонки в течение 3-5 минут, а затем поместить в инкубатор при комнатной температуре или 50 ℃ на 1-2 минуты.

A-1 Образец не свежий. —Извлеките положительный образец ДНК в качестве контроля, чтобы определить, деградировала ли ДНК в образце.

A-2 Неправильная предварительная обработка. - Причина в чрезмерном измельчении жидким азотом, возвращении влаги или слишком большом количестве пробы.

Предварительная обработка должна быть разной для разных образцов. Образцы растений следует тщательно измельчить в жидком азоте. Образцы животных гомогенезируйте или тщательно измельчите в жидком азоте. Для образцов с клеточными стенками, которые трудно разрушить, таких как G + бактерии и дрожжи, рекомендуется использовать лизоцим, литиказу или механические методы для разрушения клеточных стенок.

4992201/4992202 Набор геномной ДНК растений использует метод на основе колонки, для экстракции которого требуется хлороформ. Он особенно подходит для различных образцов растений, а также для сухого порошка растений. Hi-DNAsecure Plant Kit также основан на колонке, но без необходимости экстракции фенолом / хлороформом, что делает его безопасным и нетоксичным. Подходит для растений с высоким содержанием полисахаридов и полифенолов. 4992709/4992710 В системе DNAquick Plant используется жидкий метод. Экстракция фенолом / хлороформом также не требуется. Процедура очистки проста и быстра, без ограничений для начальных количеств пробы, поэтому пользователи могут гибко регулировать количество в соответствии с экспериментальными требованиями. Фрагменты гДНК большого размера могут быть получены с высоким выходом.

Геномную ДНК экстрагировали из различных объемов образцов цельной крови человека с помощью набора TIANamp Blood DNA Kit. Результаты следующие. Результаты приведены только для справки, фактические результаты экстракции зависят от условий образцов.

Экстракцию ДНК сгустка крови можно выполнить с использованием реагентов, входящих в эти два набора, просто изменив протокол на конкретную инструкцию по выделению ДНК сгустка крови. Электронная копия протокола извлечения ДНК сгустка крови может быть выдана по запросу.

Суспендировать свежий образец в 1 мл PBS, физиологическом растворе или буфере TE. Полностью гомогенизируйте образец в гомогенизаторе и собирайте осадок на дно пробирки центрифугированием. Удалите супернатант и ресуспендируйте осадок с 200 мкл буфера GA. Следующую очистку ДНК можно провести согласно инструкции.

Для очистки гДНК в образцах плазмы, сыворотки и биологических жидкостей рекомендуется использовать набор TIANamp Micro DNA Kit. Для очистки вирусной гДНК из образцов сыворотки / плазмы рекомендуется использовать набор TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Для очистки бактериальной гДНК из образцов сыворотки и плазмы рекомендуется использовать набор TIANamp Bacteria DNA Kit (лизоцим должен быть включен для положительных бактерий). Для образцов слюны рекомендуется использовать Hi-Swab DNA Kit и TIANamp Bacteria DNA Kit.

Для выделения генома грибов рекомендуются комплекты DNAsecure Plant Kit или DNAquick Plant System. Для экстракции генома дрожжей рекомендуется набор TIANamp Yeast DNA Kit (литиказа должна быть приготовлена ​​самостоятельно).